INTERACCIÓN DE COMPUESTOS TIOLADOS CON AgNPs EN FASE HOMOGENEA Y HETEROGENEA COMO RESPUESTA ENZIMATICA INDIRECTA
Palabras clave:
Nanopartículas de plata, Electrodos modificados, Actividad enzimática, Impedancia, PlasmónResumen
Introducción
Los compuestos organofosforados son un constituyente común de herbicidas, pesticidas, insecticidas y agentes nerviosos. Frente a una exposición crónica o aguda estos compuestos inhiben la acetilcolinesterasa (AChE), lo que conduce a trastornos respiratorios, reproductivos, nerviosos, hepáticos y renales en animales.
La determinación de tiocolina es la forma indirecta de evaluar la actividad de la AChE:
La alta afinidad de la tiocolina (grupo tiol) por la superficie de plata se estudia en una suspensión de AgNps (medida espectrofotométrica) e inmovilizadas sobre una superficie (medida electroquímica).
Resultados
Se llevaron a cabo determinaciones por espectroscopia de impedancia electroquímica (EIS) en una celda de tres electrodos serigrafiados. Los resultados del EIS se analizaron ajustando los datos a un modelo de circuito eléctrico equivalente R1[CP1(R2 CP2)]. El parámetro R1 permaneció casi constante a medida que aumentaba la cantidad de enzima, como se esperaba para un parámetro de construcción. Se observó una disminución en los valores de P1 (módulo de CP1) de 0 a 25 microlitros (1.2 U/L) de solución de enzima añadida. A su vez, en el mismo rango de concentraciones de enzima el aumento del parámetro n1 indicó una reducción del nivel de rugosidad.
Asimismo, cuanto mayor era la concentración de tiocolina generada, más se vio afectado el plasmón de la nanopartícula, lo que se visualizó por cambios en su banda de absorción en el visible. La diferencia de absorbancia disminuyó claramente al aumentar la concentración de enzima.
Conclusiones
Dadas las tendencias observadas y la alta especificidad de la reacción que genera la señal, son métodos prometedores para su uso en matrices vegetales. En las condiciones ensayadas la matriz de AgNPs resulta sensible a la concentración de enzima en rangos similares de concentraciones para ambos métodos.
Agradecimientos: OPCW, PICT 2019-1530, UBACyT20020170100037BA
